TY - JOUR

T1 - Замена гидроксилированного остатка His39 в рибосомном белке uL15 на остаток Ala или Thr нарушает трансляционную активность рибосом человека

AU - Yanshina, D. D.

AU - Gopanenko, A. V.

AU - Karpova, G. G.

AU - Malygin, A. A.

N1 - Яньшина Д.Д., Гопаненко А.В., Карпова Г.Г., Малыгин А.А. Замена гидроксилированного остатка His39 в рибосомном белке uL15 на остаток Ala или Thr нарушает трансляционную активность рибосом человека // Молекулярная биология. - 2020. - Т. 54. - № 3. - С. 512-521

PY - 2020/5/1

Y1 - 2020/5/1

N2 - Посттрансляционное гидроксилирование встречается у трех рибосомных белков млекопитающих: uS12, uL2 и uL15, ‒ которые расположены соответственно, в малой (S) и большой (L) субчастицах рибосомы вблизи ее важнейших функциональных центров – декодирующего и пептидилтрансферазного. Используя клеточные культуры, продуцирующие белок uL15, меченный 3xFLAG-эпитопом по С-концу (uL153xFLAG), или мутантные формы uL153xFLAG с заменами His39Ala, His39Thr или His40Ala, мы исследовали роль гидроксилированного остатка His39 белка uL15 в поддержании трансляционной активности рибосом. Установлено, что экзогенный uL153xFLAG способен функционально замещать эндогенный uL15 в клетках HEK293, трансфицированных соответствующей ДНК-конструкцией. Вместе с тем в клетках, продуцирующих вышеуказанные мутантные формы uL153xFLAG, трансляционная активность рибосом снижалась примерно на 35% по сравнению с клетками, продуцирующими немутированный белок. С помощью анализа структурной модели рибосомы человека нами сделано предположение о роли гидроксильной группы на His39 в локальной стабилизации структуры рибосомы ‒ через образование водородной связи между этой группой и атомом азота имидазольного кольца His40. Учитывая, что His39 располагается вблизи E-сайта рибосомы, мы полагаем, что такая стабилизация структуры рибосомы обеспечивает поддержание ее трансляционной активности

AB - Посттрансляционное гидроксилирование встречается у трех рибосомных белков млекопитающих: uS12, uL2 и uL15, ‒ которые расположены соответственно, в малой (S) и большой (L) субчастицах рибосомы вблизи ее важнейших функциональных центров – декодирующего и пептидилтрансферазного. Используя клеточные культуры, продуцирующие белок uL15, меченный 3xFLAG-эпитопом по С-концу (uL153xFLAG), или мутантные формы uL153xFLAG с заменами His39Ala, His39Thr или His40Ala, мы исследовали роль гидроксилированного остатка His39 белка uL15 в поддержании трансляционной активности рибосом. Установлено, что экзогенный uL153xFLAG способен функционально замещать эндогенный uL15 в клетках HEK293, трансфицированных соответствующей ДНК-конструкцией. Вместе с тем в клетках, продуцирующих вышеуказанные мутантные формы uL153xFLAG, трансляционная активность рибосом снижалась примерно на 35% по сравнению с клетками, продуцирующими немутированный белок. С помощью анализа структурной модели рибосомы человека нами сделано предположение о роли гидроксильной группы на His39 в локальной стабилизации структуры рибосомы ‒ через образование водородной связи между этой группой и атомом азота имидазольного кольца His40. Учитывая, что His39 располагается вблизи E-сайта рибосомы, мы полагаем, что такая стабилизация структуры рибосомы обеспечивает поддержание ее трансляционной активности

KW - HEK293 cells

KW - human ribosome

KW - hydroxylation

KW - post-translational modifications of proteins

KW - site-directed mutagenesis

KW - transfection

KW - uL15

UR - http://www.scopus.com/inward/record.url?scp=85086008346&partnerID=8YFLogxK

UR - https://www.elibrary.ru/item.asp?id=42650913

U2 - 10.31857/S0026898420030209

DO - 10.31857/S0026898420030209

M3 - статья

C2 - 32492015

AN - SCOPUS:85086008346

VL - 54

SP - 512

EP - 521

JO - Molekulyarnaya Biologiya

JF - Molekulyarnaya Biologiya

SN - 0026-8984

IS - 3

ER -