TY - JOUR

T1 - Влияние GcMAF-RF на ex vivo поляризацию макрофагов, активацию дендритных клеток и продукцию цитокинов клетками цельной крови человека

AU - Kirikovich, S. S.

AU - Levites, E. V.

AU - Dolgova, E. V.

AU - Proskurina, A. S.

AU - Ritter, G. S.

AU - Ruzanova, V. S.

AU - Leplina, O. Yu

AU - Shevela, E. Ya

AU - Ostanin, A. A.

AU - Ryabicheva, T. G.

AU - Ryzhikova, S. L.

AU - Druzhinina, Yu G.

AU - Varaksin, N. A.

AU - Chernykh, E. R.

AU - Bogachev, S. S.

N1 - Кирикович С.С., Левитес Е.В., Долгова Е.В., Проскурина А.С., Риттер Г.С., Рузанова В.С., Леплина О.Ю., Шевела Е.Я., Останин А.А., Рябичева Т.Г., Рыжикова С.Л., Дружинина Ю.Г., Вараксин Н.А., Черных Е.Р., Богачев С.С. Влияние GcMAF-RF на ex vivo поляризацию макрофагов, активацию дендритных клеток и продукцию цитокинов клетками цельной крови человека // Медицинская иммунология. - 2021. - Т. 23. - № 2. - С. 257-274 Данная работа была выполнена при поддержке бюджетного финансирования по теме государственного задания № 0259-2021-0013. Работа была выполнена при поддержке ООО «АКТИВАТОР МАФ» и ООО «БА-фарма».

PY - 2021

Y1 - 2021

N2 - Данная статья представляет собой второе сообщение из серии статей, посвященных получению отечественного препарата макрофаг-активирующего фактора (GcMAF-RF) и оценке его биологических свойств. Целью данной работы являлось изучение воздействия препарата GcMAF-RF на М0 → М1 поляризацию макрофагов (Мф) и активацию профессиональных свойств антиген-презентирующих дендритных клеток (ДК), генерированных ex vivo, а также на ex vivo продукцию провоспалительных (TNFα, IL-1β, IL-6, IFNγ, IL-17, IL-18) и противовоспалительных (TGF-β, IL-4, IL-10) цитокинов, факторов роста (IL-2, GM-CSF, G-CSF, VEGF) и хемокинов (MCP, IL-8) клетками цельной крови здоровых доноров. Мф и ДК генерировали из моноцитов (3-5 × 106 /мл) прилипающей фракции мононуклеарных клеток (МНК) периферической крови здоровых доноров; при этом для получения Мф использовали гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор (rhGM-CSF), а при получении ДК - GM-CSF и интерферон-α. В качестве М1-поляризующих сигналов использовали липополисахарид (LPS Е. coli 0114:B4) (контроль) либо препарат GcMAF-RF (опыт), которые добавляли за 48 ч до окончания культивирования. Стимулирующее влияние полученных Мф и ДК на пролиферацию клеток оценивали в аллогенной смешанной культуре лейкоцитов (алло-СКЛ) радиометрически по включению 3H-тимидина. Индекс влияния (ИВ) Мф или ДК на алло-СКЛ рассчитывали как отношение пролиферативного ответа МНК в присутствии Мф или ДК к уровню спонтанной пролиферации МНК. Для определения продукции цитокинов клетками цельной крови человека ex vivo использовали образцы периферической крови 3 доноров с двумя повторностями препарата GcMAF-RF, итого 6 вариантов. Все варианты исследования проведены на активированных митогеном и неактивированных клетках крови. Содержание цитокинов определяли методом твердофазного иммуноферментного анализа. Для количественной оценки воздействия GcMAF-RF использован индекс влияния (ИВ) как отношение продукции цитокина в присутствии GcMAF-RF к уровню спонтанной продукции. Показано, что препарат GcMAF-RF эффективно, как и «стандартный» активатор Мф и ДК липополисахарид (LPS), индуцирует поляризацию дифференцированных М0-макрофагов в М1-клетки и конечное созревание ДК, что проявляется значимым усилением их аллостимуляторной активности в смешанной культуре лейкоцитов (алло-СКЛ). Кроме того, препарат GcMAF-RF стимулирует продукцию клетками крови (гранулоцитами, лимфоцитами, моноцитами) широкий спектр цитокинов и хемокинов (TNFα, IL-1β, IL-6, IL-18, IL-4, IL-10, GM-CSF, G-CSF, VEGF, IL-8), что свидетельствует о прямом участии активатора макрофагов GcMAF-RF в различных иммунных процессах. Таким образом, отечественный препарат GcMAF-RF индуцирует поляризацию макрофагов M0 → M1, конечное созревание ДК и аллостимулирующую активность Мф и ДК, а также способен эффективно стимулировать циркулирующие клетки крови к синтезу цитокинов/хемокинов с провоспалительной и иммунорегуляторной активностью.

AB - Данная статья представляет собой второе сообщение из серии статей, посвященных получению отечественного препарата макрофаг-активирующего фактора (GcMAF-RF) и оценке его биологических свойств. Целью данной работы являлось изучение воздействия препарата GcMAF-RF на М0 → М1 поляризацию макрофагов (Мф) и активацию профессиональных свойств антиген-презентирующих дендритных клеток (ДК), генерированных ex vivo, а также на ex vivo продукцию провоспалительных (TNFα, IL-1β, IL-6, IFNγ, IL-17, IL-18) и противовоспалительных (TGF-β, IL-4, IL-10) цитокинов, факторов роста (IL-2, GM-CSF, G-CSF, VEGF) и хемокинов (MCP, IL-8) клетками цельной крови здоровых доноров. Мф и ДК генерировали из моноцитов (3-5 × 106 /мл) прилипающей фракции мононуклеарных клеток (МНК) периферической крови здоровых доноров; при этом для получения Мф использовали гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор (rhGM-CSF), а при получении ДК - GM-CSF и интерферон-α. В качестве М1-поляризующих сигналов использовали липополисахарид (LPS Е. coli 0114:B4) (контроль) либо препарат GcMAF-RF (опыт), которые добавляли за 48 ч до окончания культивирования. Стимулирующее влияние полученных Мф и ДК на пролиферацию клеток оценивали в аллогенной смешанной культуре лейкоцитов (алло-СКЛ) радиометрически по включению 3H-тимидина. Индекс влияния (ИВ) Мф или ДК на алло-СКЛ рассчитывали как отношение пролиферативного ответа МНК в присутствии Мф или ДК к уровню спонтанной пролиферации МНК. Для определения продукции цитокинов клетками цельной крови человека ex vivo использовали образцы периферической крови 3 доноров с двумя повторностями препарата GcMAF-RF, итого 6 вариантов. Все варианты исследования проведены на активированных митогеном и неактивированных клетках крови. Содержание цитокинов определяли методом твердофазного иммуноферментного анализа. Для количественной оценки воздействия GcMAF-RF использован индекс влияния (ИВ) как отношение продукции цитокина в присутствии GcMAF-RF к уровню спонтанной продукции. Показано, что препарат GcMAF-RF эффективно, как и «стандартный» активатор Мф и ДК липополисахарид (LPS), индуцирует поляризацию дифференцированных М0-макрофагов в М1-клетки и конечное созревание ДК, что проявляется значимым усилением их аллостимуляторной активности в смешанной культуре лейкоцитов (алло-СКЛ). Кроме того, препарат GcMAF-RF стимулирует продукцию клетками крови (гранулоцитами, лимфоцитами, моноцитами) широкий спектр цитокинов и хемокинов (TNFα, IL-1β, IL-6, IL-18, IL-4, IL-10, GM-CSF, G-CSF, VEGF, IL-8), что свидетельствует о прямом участии активатора макрофагов GcMAF-RF в различных иммунных процессах. Таким образом, отечественный препарат GcMAF-RF индуцирует поляризацию макрофагов M0 → M1, конечное созревание ДК и аллостимулирующую активность Мф и ДК, а также способен эффективно стимулировать циркулирующие клетки крови к синтезу цитокинов/хемокинов с провоспалительной и иммунорегуляторной активностью.

KW - Cytokines

KW - Dendritic cells

KW - Macrophage-activating factor (GcMAF-RF)

KW - Macrophages

UR - http://www.scopus.com/inward/record.url?scp=85105665299&partnerID=8YFLogxK

UR - https://www.elibrary.ru/item.asp?id=45658586

U2 - 10.15789/1563-0625-EOM-2132

DO - 10.15789/1563-0625-EOM-2132

M3 - статья

AN - SCOPUS:85105665299

VL - 23

SP - 257

EP - 274

JO - Medical Immunology (Russia)

JF - Medical Immunology (Russia)

SN - 1563-0625

IS - 2

M1 - 6

ER -