TY - JOUR

T1 - Создание и характеристика унифицированной модельной системы in vitro для сравнительного анализа вариантов гена GJB2, ассоциированных с потерей слуха

AU - Маслова, Екатерина Александровна

AU - Посух, Ольга Леонидовна

AU - Орищенко, Константин Евгеньевич

N1 - Маслова, Е. А. Создание и характеристика унифицированной модельной системы in vitro для сравнительного анализа вариантов гена GJB2, ассоциированных с потерей слуха / Е. А. Маслова, О. Л. Посух, К. Е. Орищенко // Медицинская генетика. – 2025. – Т. 24, № 6. – С. 92-94. – DOI 10.25557/2073-7998.2025.06.92-94. – EDN VXXNNE. Работа выполнена в рамках бюджетного проекта Института цитологии и генетики СО РАН № FWNR-2022-0021 и при финансовой поддержке Министерства науки и высшего образования Российской Федерации в рамках проекта государственного задания № FSUS-2024-0018.

PY - 2025

Y1 - 2025

N2 - Функциональный анализ мутационных изменений генов в модельных системах in vitro играет ключевую роль в понимании молекулярных механизмов наследственных патологий и является важным критерием обоснования патогенности того или иного варианта. Патогенные варианты гена GJB2, кодирующего трансмембранный белок Сх26, являются одной из наиболее частых причин потери слуха во многих популяциях человека. Ранее нами на основе клеточной линии HeLa с помощью системы CRISPR/Cas9 были получены субклональные линии с нокаутом гена GJB2. Одна из них послужила основой для генерации трансгенных клеточных линий с постоянной экспрессией ряда мутантных GJB2-вариантов, выявленных у пациентов с потерей слуха. Целью данной работы является характеристика и дальнейшее развитие панели трансгенных клеточных линий HeLa, стабильно экспрессирующих различные варианты гена GJB2, для проведения сравнительного функционального анализа эффектов мутантных GJB2-вариантов на структуру и функции белка Сх26. С учетом особенностей «жизненного цикла» белка Сх26, определены подходы и разработан комплекс экспериментальных методов для оценки экспрессии мутантных GJB2-вариантов, для оценки внутриклеточной локализации и способности мутантных форм белка Сх26 формировать функциональные гемиканалы/каналы.

AB - Функциональный анализ мутационных изменений генов в модельных системах in vitro играет ключевую роль в понимании молекулярных механизмов наследственных патологий и является важным критерием обоснования патогенности того или иного варианта. Патогенные варианты гена GJB2, кодирующего трансмембранный белок Сх26, являются одной из наиболее частых причин потери слуха во многих популяциях человека. Ранее нами на основе клеточной линии HeLa с помощью системы CRISPR/Cas9 были получены субклональные линии с нокаутом гена GJB2. Одна из них послужила основой для генерации трансгенных клеточных линий с постоянной экспрессией ряда мутантных GJB2-вариантов, выявленных у пациентов с потерей слуха. Целью данной работы является характеристика и дальнейшее развитие панели трансгенных клеточных линий HeLa, стабильно экспрессирующих различные варианты гена GJB2, для проведения сравнительного функционального анализа эффектов мутантных GJB2-вариантов на структуру и функции белка Сх26. С учетом особенностей «жизненного цикла» белка Сх26, определены подходы и разработан комплекс экспериментальных методов для оценки экспрессии мутантных GJB2-вариантов, для оценки внутриклеточной локализации и способности мутантных форм белка Сх26 формировать функциональные гемиканалы/каналы.

KW - НАСЛЕДСТВЕННАЯ ПОТЕРЯ СЛУХА

KW - ГЕН GJB2

KW - CX26

KW - МУТАНТНЫЕ ВАРИАНТЫ

KW - ФУНКЦИОНАЛЬНЫЙ АНАЛИЗ IN VITRO

KW - ТРАНСГЕННЫЕ КЛЕТОЧНЫЕ ЛИНИИ

UR - https://elibrary.ru/item.asp?id=82971987

U2 - 10.25557/2073-7998.2025.06.92-94

DO - 10.25557/2073-7998.2025.06.92-94

M3 - статья

VL - 24

SP - 92

EP - 94

JO - Медицинская генетика

JF - Медицинская генетика

SN - 2073-7998

IS - 6

ER -