Результаты исследований: Научные публикации в периодических изданиях › статья › Рецензирование
Моделирование нейродегенеративных заболеваний, вызванных протеинопатией, на культурах клеток человека. / Malakhova, Anastasia A.; Allayarova, Elina R.; Sharipova, Dinara V. и др.
в: Vestnik Tomskogo Gosudarstvennogo Universiteta, Biologiya, № 69, 2025, стр. 103-112.Результаты исследований: Научные публикации в периодических изданиях › статья › Рецензирование
}
TY - JOUR
T1 - Моделирование нейродегенеративных заболеваний, вызванных протеинопатией, на культурах клеток человека
AU - Malakhova, Anastasia A.
AU - Allayarova, Elina R.
AU - Sharipova, Dinara V.
AU - Pavlova, Sophia V.
AU - Grigor’eva, Elena V.
AU - Medvedev, Sergey P.
AU - Zakian, Suren M.
N1 - Источник финансирования: работа выполнена при поддержке Фонда научно-технологического развития Югры в соответствии с проектом № 2023-573-05/2023. Благодарности: в работе использовали оборудование Центра коллективного пользования микроскопического анализа биологических объектов ИЦиГ СО РАН (https://ckp.icgen.ru/ckpmabo/, поддержан бюджетным проектом ИЦиГ СО РАН FWNR-2022-0015), а также ЦКП (http://www.niboch.nsc.ru/doku.php/corefacility). «Геномика» СО РАН Малахова А.А., Аллаярова Э.Р., Шарипова Д.В., Павлова С.В., Григорьева Е.В., Медведев С.П., Закиян С.М. Моделирование нейродегенеративных заболеваний, вызванных протеинопатией, на культурах клеток человека // Вестник Томского государственного университета. Биология. - 2025. - № 69. - С. 103–112. doi: 10.17223/19988591/69/12
PY - 2025
Y1 - 2025
N2 - Причиной развития большинства нейродегенеративных заболеваний являются протеинопатии, связанные с накоплением в нейронах агрегатов неправильно свернутых белков синуклеина при болезни Паркинсона, амилоида при болезни Альцгеймера, хантингтина при болезни Гентингтона и др., что приводит к нарушению функционирования лизосомального аппарата, дисфункции митохондрий и в конечном итоге к клеточной гибели. Для изучения патологических процессов, приводящих к гибели нейронов, нами созданы клеточные модели на основе индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (ИПСК) с докси-циклин-управляемой экспрессией альфа-синуклеина (SNCA), содержащего эпитопы 3×FLAG и 2×Strep-Tag II, необходимые для аффинной очистки белковых комплексов, взаимодействующих с альфа-синуклеином. Трансгены, кодирующие химерный белок SNCA-C-3×FLAG-2×ST и трансактиватор M2rtTA, внесены в локус AAVS1 ИПСК пациента с болезнью Паркинсона с помощью системы редактирования генома CRISPR/Cas9. Подтвержден плюрипотентный статус полученных трансгенных клонов ИПСК и проведена направленная дифференцировка в нейроны. Экспрессия SNCA-C-3×FLAG-2×ST в нейронах, дифференцированных из ИПСК, подтверждена Вестерн-блот-анализом. Полученные клеточные модели обладают способностью к неограниченной пролиферации в культуре, что позволяет планировать эксперименты по изучению взаимодействий альфа-синуклеина с различными белками и структурами в клетках человека при синуклеинопатиях, а также проводить тестирование потенциальных лекарственных препаратов на любых типах клеток организма человека, которые можно получить в результате направленной дифференцировки ИПСК. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
AB - Причиной развития большинства нейродегенеративных заболеваний являются протеинопатии, связанные с накоплением в нейронах агрегатов неправильно свернутых белков синуклеина при болезни Паркинсона, амилоида при болезни Альцгеймера, хантингтина при болезни Гентингтона и др., что приводит к нарушению функционирования лизосомального аппарата, дисфункции митохондрий и в конечном итоге к клеточной гибели. Для изучения патологических процессов, приводящих к гибели нейронов, нами созданы клеточные модели на основе индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (ИПСК) с докси-циклин-управляемой экспрессией альфа-синуклеина (SNCA), содержащего эпитопы 3×FLAG и 2×Strep-Tag II, необходимые для аффинной очистки белковых комплексов, взаимодействующих с альфа-синуклеином. Трансгены, кодирующие химерный белок SNCA-C-3×FLAG-2×ST и трансактиватор M2rtTA, внесены в локус AAVS1 ИПСК пациента с болезнью Паркинсона с помощью системы редактирования генома CRISPR/Cas9. Подтвержден плюрипотентный статус полученных трансгенных клонов ИПСК и проведена направленная дифференцировка в нейроны. Экспрессия SNCA-C-3×FLAG-2×ST в нейронах, дифференцированных из ИПСК, подтверждена Вестерн-блот-анализом. Полученные клеточные модели обладают способностью к неограниченной пролиферации в культуре, что позволяет планировать эксперименты по изучению взаимодействий альфа-синуклеина с различными белками и структурами в клетках человека при синуклеинопатиях, а также проводить тестирование потенциальных лекарственных препаратов на любых типах клеток организма человека, которые можно получить в результате направленной дифференцировки ИПСК. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
KW - CRISPR/Cas9
KW - alpha-synuclein
KW - iPSC-based cell models
KW - neurodegenerative diseases
KW - proteinopathy
KW - клеточные модели на основе ИПСК
KW - протеинопатия
KW - альфа-синуклеин
KW - нейродегенеративные заболевания
KW - CRISPR/CAS9
UR - https://www.mendeley.com/catalogue/1d4d1c9c-5b82-3cc2-b1b1-dd377f22fd04/
UR - https://www.scopus.com/record/display.uri?eid=2-s2.0-105006730896&origin=inward&txGid=8bcac0e8e554b419895187a28b2c99f7
UR - https://www.elibrary.ru/item.asp?id=80635027
U2 - 10.17223/19988591/69/12
DO - 10.17223/19988591/69/12
M3 - статья
SP - 103
EP - 112
JO - Вестник Томского государственного университета. Биология
JF - Вестник Томского государственного университета. Биология
SN - 1998-8591
IS - 69
ER -
ID: 67455528